新品速遞 限時(shí)半價(jià) C0050 ?BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒

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即日起至7.31 限時(shí)半價(jià)

500 T﹣目錄價(jià)420，折后價(jià)210

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??產(chǎn)品描述：

BCA（Bicinchoninic acid）是應(yīng)用最廣泛的蛋白濃度測(cè)定方法，常用于蛋白提取后的定量檢測(cè)，具有操作簡(jiǎn)單、穩(wěn)定性好、靈敏度高和兼容性高等優(yōu)勢(shì)。

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BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒的檢測(cè)原理涉及兩步化學(xué)反應(yīng)，第一步基于雙縮脲反應(yīng)，在堿性環(huán)境下蛋白質(zhì)與二價(jià)銅離子絡(luò)合并將二價(jià)銅離子還原為一價(jià)銅離子，形成藍(lán)色復(fù)合物。第二步是BCA與一價(jià)銅離子結(jié)合形成穩(wěn)定的藍(lán)紫色復(fù)合物，該復(fù)合物在562 nm處有較高的吸光值，并與蛋白質(zhì)濃度呈正比。

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??包裝清單：

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??產(chǎn)品特點(diǎn)：

1.?靈敏度高：最小檢測(cè)蛋白量達(dá)到0.5 μg，檢測(cè)濃度下限達(dá)到25 μg/mL，待測(cè)樣品體積為1-20 μL。

2.?線性范圍廣：在25-2000?μg/mL濃度范圍內(nèi)有較好的線性關(guān)系。

3.?操作簡(jiǎn)單：正常情況下可在45分鐘內(nèi)完成測(cè)定，比經(jīng)典Lowry方法速度快四倍。

4.?兼容性好：BCA法測(cè)定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學(xué)物質(zhì)的影響，可以兼容樣品中高達(dá)5%的SDS，5%的Triton X-100，5%的Tween 20、60、80。但本試劑盒受螯合劑和略高濃度的還原劑的影響，需確保EDTA低于10mM，無EGTA，DTT低于1mM，β-Mercaptoethanol低于0.01%。

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??操作說明：

1.?蛋白標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣品的準(zhǔn)備

1)?向一管30 mg的BSA蛋白標(biāo)準(zhǔn)品中加入1.2 mL蛋白標(biāo)準(zhǔn)品配制液，充分溶解后配制成25 mg/mL的蛋白標(biāo)準(zhǔn)品溶液。配制后儲(chǔ)存于-20°C。

2)?取適量25 mg/mL的蛋白標(biāo)準(zhǔn)品溶液，用蛋白稀釋液稀釋至終濃度0.5 mg/mL?？砷L(zhǎng)期儲(chǔ)存于-20℃。

注：待測(cè)蛋白樣品在什么溶液中，蛋白稀釋液也宜為相同溶液。也可以用0.9% NaCl或PBS作蛋白稀釋液。

3)?將0.5 mg/mL的蛋白標(biāo)準(zhǔn)品溶液，按0、1、2、4、8、12、16、20 μL加到96孔板的標(biāo)準(zhǔn)品孔中，再分別加蛋白稀釋液補(bǔ)足至20 μL，相當(dāng)于蛋白標(biāo)準(zhǔn)品濃度分別為0、0.025、0.05、0.1、0.2、0.3、0.4，0.5?mg/mL。

4)?加適當(dāng)體積待測(cè)樣品到96孔板的樣品孔中。如果樣品不足20?μL，需加蛋白稀釋液補(bǔ)足到20?μL。

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2.?BCA工作液配制

根據(jù)樣品數(shù)量，按50體積BCA試劑A加1體積BCA試劑B（50：1）配制適量BCA工作液，充分混勻。例如5?mL BCA試劑A加100?μL BCA試劑B，混勻，配制成5.1?mL BCA工作液。BCA工作液室溫24小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。

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3.?蛋白濃度測(cè)定

1)?各孔加入200 μL?BCA工作液， 60℃放置30分鐘。

注：BCA法測(cè)定蛋白濃度時(shí)，顏色會(huì)隨著時(shí)間的延長(zhǎng)不斷加深。并且顯色反應(yīng)會(huì)因溫度升高而加快。如果濃度較低，適合在較高溫度孵育，或適當(dāng)延長(zhǎng)孵育時(shí)間。注意保持定時(shí)和定溫，以確保精確定量。

2)?用酶標(biāo)儀測(cè)定562?nm波長(zhǎng)的吸光度。

3)?根據(jù)BSA標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線（X-蛋白濃度ug/mL；Y-A562）。依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線和樣品的稀釋倍數(shù)計(jì)算樣品蛋白濃度。

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??不同品牌?BCA 試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)?

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??保存條件

試劑盒中的A、B液及蛋白標(biāo)準(zhǔn)品配制液室溫保存。蛋白標(biāo)準(zhǔn)品（BSA）粉末室溫保存，配成溶液后可置于-20℃保存一年。

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??注意事項(xiàng)

1.?本方法適合用于96孔板使用酶標(biāo)儀檢測(cè)。如果沒有酶標(biāo)儀，也可以使用普通的分光光度計(jì)測(cè)定，但測(cè)定時(shí)，需根據(jù)比色皿的最小檢測(cè)體積，適當(dāng)加大BCA工作液和標(biāo)準(zhǔn)品、樣品的用量。

2.?低溫或長(zhǎng)期保存時(shí)，若發(fā)現(xiàn)試劑A或試劑B有沉淀，請(qǐng)37oC溫育并攪拌使其充分溶解。如發(fā)現(xiàn)細(xì)菌污染，則應(yīng)丟棄，避免對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成影響。

3.?建議每次測(cè)定都做相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線，因?yàn)轱@色反應(yīng)與溫度和時(shí)間的變化有關(guān)，精準(zhǔn)的蛋白定量宜每次都做標(biāo)準(zhǔn)曲線。

4.?本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。

5.?為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。